母乳を24時間以上保存する場合は冷凍が適しています。母乳をしぼり、市販の冷凍用母乳パックに入れて冷凍します。

冷凍した母乳パックを保育園へ運ぶ際は、保冷バッグに入れて溶けないようにしてください。解凍時に加熱しすぎると免疫物質が壊れてしまうので、熱いお湯や電子レンジでの解凍は行わないでください。水道水かなまぬるいお湯に母乳パックをつけて解凍（その時出来るかぎり冷凍母乳パックの開閉口ー母乳を入れて閉じた部分は水に浸さないようにすると衛星的です）又は、冷蔵庫に移して解凍してください。冷凍庫で一か月程度保存できます。（家庭の冷蔵庫は開閉も多く温度が変動することもあり出来るだけ早く使用しましょう）

衛生面で一番注意していただきたいのは搾乳時の細菌の混入です。お母さんの手指や乳首周囲に細菌がいる恐れがありますので、搾乳前によく手を洗い、乳房をきれいにふいてください。

家庭で祖母に預かってもらう場合など、冷蔵する方法がありますが、冷蔵庫にはほかの食品があり頻繁に冷蔵庫を開けるため庫内の温度が一定でないなど、衛生面で問題があります。冷蔵保存の場合は細菌の混入、温度に注意して、24時間以内に飲ませてください。